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血液SOP文件
河北省临床实验室质量管理体系文件〔范本〕
河北省人民医院检验科文件
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血液实验室作业指导书

河北省张家口市第二医院检验科
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河北省张家口市第二医院
凝血酶原时间-纤维蛋白原〔PT-FIB〕测定
1. 实验原理
本实验可同时测定凝血酶原时间〔PT〕和纤维蛋白原〔FIB〕浓度。
原理：确定量的抗凝血浆〔50微升〕样本经一定时间加温后，将组织凝血活酶、钙离子参加其中，激活外源凝血途径，产生纤维蛋白血凝块，通过660nm光照射血浆，测定其凝固过程中90o散射光变化，然后通过标准曲线求出凝血酶原时间，再通过参数计算得出凝血酶原活动度及INR值。
在检测PT的同时，血浆浊度的变化与血浆中FIB的含量成正相关，通过测定凝固终点和起始点光散射强度的差值，再根据试验前已经做出的由不同FIB浓度与相应的光散射差值关系的标准曲线即可推测出FIB的浓度。
2. 标本采集
2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右)，静脉采血。
2.2 3.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml，混匀。
3. 标本存放：全血贮存在4～10oC不超过2小时，最好1小时内(3000r/min
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×15min)别离血浆，此血浆在室温22～24oC下可存放2小时，在2～4oC可存放4小时，在-20oC可存放2周，长时间保存需在冰冻条件下，在-70oC可存放6个月。
冷冻血浆融化时，应将盛血浆的容器置37oC水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，解冻后立即测试。冷冻过的标本不能再次冷冻，否那么结果不准确。
4. 标本运输：低温条件下运输。
5. 标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定。
6. 实验材料：
6.1每个试剂均购自德国Dade Behring Marburg公司。
1〕PT-FIB测定试剂盒〔代号P/N: 84688210〕
兔脑促凝血激酶 10mL X8瓶
2〕定标血浆 Calibration Plasma〔代号P/N:20003700〕
3〕参比液 Reference Emulsion〔代号P/N:9756900〕
4〕因子稀释液 Factor diluent〔代号P/N: 9757600〕
5〕正常质控血浆 Normal control plasma〔代号P/N:20003110〕
6〕低水平质控血浆 Abnormal control plasma level I/Low〔代号P/N: 20003210〕
7〕高水平质控血浆 Abnormal control plasma level II/High〔代号P/N: 20003310〕
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注：促凝血酶原激酶
当用不同的促凝血酶原激酶，或用不同的检测方法〔手工、半自动、全自动〕做PT测试时，其秒数结果将会有较显著的差异。而对于口服抗凝药的病人来说，需要一个能进行比拟的PT结果。
国际血液血标准委员会〔ICSH〕及国际血栓与止血委员会〔ICTH〕建议，根据试剂的ISI值〔国际敏感度指数〕计算INR值〔国际标准化比值〕，并以INR值作为PT的通用结果报告。
根据经验及文献报道，试剂的灵敏度一手测试方法及机器自动化程度的影响。但美国贝克曼库尔特公司提供的PT-FIB试剂，每一批号都经过了严格的测试，与ICSH及ICTH的参考品有很好的相关性，其ISI值均注明在试剂盒说明书中。在ACL7000上，当输入试剂的ISI值后，机器会自动给出INR值。
INR=(PT Ratio) ISI
6.2试剂准备
用8mL NCCLS II型或相同质量的蒸馏水溶解1瓶促凝血激酶，盖上盖子，轻摇至完全溶解，置15～25oC30分钟，用前摇匀，勿用力振摇。