生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定

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1、水浴加热水浴加热苏丹苏丹染液染液苏丹苏丹染液染液镜检镜检镜检镜检 橘黄色橘黄色 红色红色双缩脲双缩脲（NHNH2 2-CO-NH-CO-NH-CO-NH-CO-NH2 2）是两个分子是两个分子脲脲（即尿（即尿素）经素）经180180左右加热，放出一个分子左右加热，放出一个分子氨氨（NH3NH3）后）后得到的产物。得到的产物。双缩脲反应双缩脲反应即在碱性溶液（即在碱性溶液（NaOHNaOH）中，双缩脲能与铜）中，双缩脲能与铜离子（离子（Cu2+Cu2+）作用，形成紫红色络合物。）作用，形成紫红色络合物。双缩脲试剂双缩脲试剂用于通过用于通过双缩脲反应双缩脲反应检测双缩脲，因蛋检测双缩脲，因蛋白质中

2、也有白质中也有-CONH-CONH-基也可用于检验蛋白质，与蛋白基也可用于检验蛋白质，与蛋白质接触后的颜色呈紫色。质接触后的颜色呈紫色。（1 1）还原糖的鉴定）还原糖的鉴定1 11 11 11 11 1辨析比较辨析比较 斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析比较比较项目项目斐林试剂斐林试剂双缩脲试剂双缩脲试剂不不同同点点使用使用方法方法甲液和乙液混合均匀后方可甲液和乙液混合均匀后方可使用，且现配现用使用，且现配现用 使用时先加使用时先加A A液再加液再加B B液液 呈色呈色反应反应条件条件需水浴加热需水浴加热不需加热即可反应不需加热即可反应反应反应原理原理还原糖中的醛基被

3、还原糖中的醛基被CuCu( (OHOH) )2 2氧氧化化, ,CuCu( (OHOH) )2 2被还原为被还原为CuCu2 2O O 具有肽键的化合物在碱具有肽键的化合物在碱性条件下与性条件下与CuCu2+2+反应生反应生成络合物成络合物 颜色颜色砖红色砖红色紫色紫色浓度浓度乙液乙液CuSOCuSO4 4浓度为浓度为0.05g/0.05g/mLmL B B液液CuSOCuSO4 4浓度为浓度为0.01 0.01 g g/ /mLmL相同点相同点 相同点相同点都含有都含有NaOHNaOH、CuSOCuSO4 4两种成分，且所用两种成分，且所用NaOHNaOH浓度都是浓度都是0.10.1g g/

4、 /mLmL (2)盐酸可改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细盐酸可改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于与蛋白质分离，有利于DNA 与染色剂结合与染色剂结合。实验：观察实验：观察DNA和和RNA在细胞中的分布在细胞中的分布 2实验流程 冲洗涂片：用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10 s 3实验现象及相关结论 现象现象结论结论 绿色明显集中且接绿色明显集中且接近细胞中央近细胞中央 DNA主要分布于主要分布于细胞核中细胞核中 绿色周围的红色范绿色周围的红色范围较广围较广 RNA广泛分布于广泛分布于细胞质中细胞质中 实验结果示例实验结果示例

5、材料选择材料选择1.生物实验选材基本要求生物实验选材基本要求:符合实验要求符合实验要求易获取的原则易获取的原则不对实验结果产生干扰不对实验结果产生干扰2.本实验选材初步分析：本实验选材初步分析： 真核细胞真核细胞（如：洋葱鳞片叶表皮细胞，人的口腔上皮细胞等。（如：洋葱鳞片叶表皮细胞，人的口腔上皮细胞等。该实验不宜选用绿色植物的叶肉细胞。该实验不宜选用绿色植物的叶肉细胞。）本实验的注意事项 (1)几种液体在实验中的作用几种液体在实验中的作用 0.9%的的NaCl溶液：保持口腔上皮细胞正常溶液：保持口腔上皮细胞正常形态形态 8%的盐酸：的盐酸： a.改变细胞膜的通透性改变细胞膜的通透性 b使染色体中使染色体中DNA与蛋白质分离与蛋白质分离 蒸馏水：蒸馏水：a.配制染色剂；配制染色剂；b.冲洗载玻片冲洗载玻片(2)关于甲基绿和吡罗红溶液的配制：甲基绿关于甲基绿和吡罗红溶液的配制：甲基绿吡罗红染色液包括吡罗红染色液包括A液和液和B液，使用时液，使用时现用现现用现配配。