高效液相色谱培训课件.docx
上传者：2623466021
2022-05-26 19:37:09上传
DOCX文件
68 KB
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
培 训 课 件
年月
目 录
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
……..液相色谱的理论部分
……..液相色谱的操作部分（三聚******的检测）
……..色谱柱的安装
…….. 三聚******检测卡的使用
…….. 水解蛋白的检测
.…….灰分的测定
…….马弗炉的使用
……..食品中蛋白质的测定
……仪器回收率的测定
……的使用
……..塑化剂的检测
一、高效液相色谱的理论部分
色谱定义
色谱法：利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术。
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
流动相：携带样品流过整个系统的流体。
固定相：静止不动的一相，色谱柱。
色谱的分类
高效液相色谱。、气相色谱。、薄层色谱。、毛细管电泳。
色谱优点
同时分析。、分离性能好。、灵敏度高（—）。、进样量小（—μ）。
色谱要求
水：专门的纯水机或超纯水机，理想的用水应为18.2MΩ 超纯水，并通过μ的滤膜，除去热源、有机物、无机离子等。不管采用何种途径，配制流动相应用新鲜水。
有机溶剂：色谱纯，用前需要有机膜过滤，超声。
缓冲盐：水系膜过滤，超声，冷藏，易长菌。使用前后必需要用：的甲醇水过渡，不能直接使用纯有机溶剂。否则会造成腐蚀、磨损、阻塞等现象。使用前后，需要用纯水冲洗泵头清洗管路，易受细菌和霉菌的影响。
脱气（超声）：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡。泵中气泡使液流波动，改变保留时间各峰面积；柱中气泡使流动相绕流，峰变形；检测器中的气泡产生基线波动。
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高压梯度洗脱：用两台高压输液泵将两种溶剂输入。避免分析时间长，分离度差，在最短时间内获得最佳的分离。
柱温箱，我们设定的柱温为40℃，这样是为了分析结果重现性好，提高柱效，降低柱压，保证检测稳定性。
分析柱的维护
在使用新柱之前，最好用强溶剂在低流量下（）冲洗，长时间未用的分析柱也要同样处理。
定期作用强溶剂冲洗柱子。
我们使用的流动相主要是缓冲盐，要先用：的甲醇水溶液冲洗，再用有机溶剂冲洗。
净化样品。
分离条件。
不使用时，要盖上盖子，避免固定相干涸。
紫外检测器，原理基于被分析组分对特定波长紫外光的选择性吸收。
我们现有这种方法最低检出限为，所以对于小于的低含量样品，我们只能做到定性检测。
色谱峰的定性鉴别 通过目标物的保留时间进行定性，需要指定保留时间误差范围（时间窗、时间带）。
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
在相同的分析条件下 保留时间相同并不肯定是同样的组份，保留时间不同肯定不是同样的组份。
定性确认 仅仅通过保留时间并不能完全确证该物质，通过加入标准物确认，通过色谱条件确认，质谱联用也可以作为进一步确证的手段。
十、外标法 是实验室常用的定量方法，定量结果准确。其特点：
、不需要所有峰都流出或被检测到，只对目标组分作校正。
、需要标准样品。
、进样量必须准确。
、仪器必须有良好的稳定性。
十一、吸液过滤器清洗：用纯的异丙醇或的稀***超声，超声清洗无效时，需要更换。检查吸滤器网眼堵塞的方法，取出过滤部分，记录压力波形。如果取出后压力波形不正常，则吸滤器网眼堵塞。
二、液相色谱操作部分
液相色谱简易流程图
溶剂→输液泵→进样器→色谱柱→检测器→数据处理
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
一、原理：试样用三***乙酸溶液乙***提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色谱测定，外标法定量。
二、试剂与材料
除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。
甲醇：色谱纯。
乙***：色谱纯。
氨水：含量为～。
三***乙酸：()准确称取10g三***乙酸于1L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混匀后备用。。
柠檬酸。
辛烷磺酸钠：色谱纯。
离子对试剂缓冲溶液：准确称取2.10g柠檬酸和2.16g辛烷磺酸钠，加入约水溶解，调节至后，定容至1L备用。
甲醇水溶液：准确量取甲醇和水混匀后，用有机系膜过滤，超声半小时，备用。并在下一次用前需要再超声—。
氨化甲醇溶液（）：准确量取氨水和甲醇，混匀后备用。
三聚******标准品：，纯度大于。
三聚******标准储备液：准确称取（精确到）三聚******标准品于容量瓶中，
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
培 训 课 件
年月
目 录
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
……..液相色谱的理论部分
……..液相色谱的操作部分（三聚******的检测）
……..色谱柱的安装
…….. 三聚******检测卡的使用
…….. 水解蛋白的检测
.…….灰分的测定
…….马弗炉的使用
……..食品中蛋白质的测定
……仪器回收率的测定
……的使用
……..塑化剂的检测
一、高效液相色谱的理论部分
色谱定义
色谱法：利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术。
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
流动相：携带样品流过整个系统的流体。
固定相：静止不动的一相，色谱柱。
色谱的分类
高效液相色谱。、气相色谱。、薄层色谱。、毛细管电泳。
色谱优点
同时分析。、分离性能好。、灵敏度高（—）。、进样量小（—μ）。
色谱要求
水：专门的纯水机或超纯水机，理想的用水应为18.2MΩ 超纯水，并通过μ的滤膜，除去热源、有机物、无机离子等。不管采用何种途径，配制流动相应用新鲜水。
有机溶剂：色谱纯，用前需要有机膜过滤，超声。
缓冲盐：水系膜过滤，超声，冷藏，易长菌。使用前后必需要用：的甲醇水过渡，不能直接使用纯有机溶剂。否则会造成腐蚀、磨损、阻塞等现象。使用前后，需要用纯水冲洗泵头清洗管路，易受细菌和霉菌的影响。
脱气（超声）：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡。泵中气泡使液流波动，改变保留时间各峰面积；柱中气泡使流动相绕流，峰变形；检测器中的气泡产生基线波动。
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高压梯度洗脱：用两台高压输液泵将两种溶剂输入。避免分析时间长，分离度差，在最短时间内获得最佳的分离。
柱温箱，我们设定的柱温为40℃，这样是为了分析结果重现性好，提高柱效，降低柱压，保证检测稳定性。
分析柱的维护
在使用新柱之前，最好用强溶剂在低流量下（）冲洗，长时间未用的分析柱也要同样处理。
定期作用强溶剂冲洗柱子。
我们使用的流动相主要是缓冲盐，要先用：的甲醇水溶液冲洗，再用有机溶剂冲洗。
净化样品。
分离条件。
不使用时，要盖上盖子，避免固定相干涸。
紫外检测器，原理基于被分析组分对特定波长紫外光的选择性吸收。
我们现有这种方法最低检出限为，所以对于小于的低含量样品，我们只能做到定性检测。
色谱峰的定性鉴别 通过目标物的保留时间进行定性，需要指定保留时间误差范围（时间窗、时间带）。
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
在相同的分析条件下 保留时间相同并不肯定是同样的组份，保留时间不同肯定不是同样的组份。
定性确认 仅仅通过保留时间并不能完全确证该物质，通过加入标准物确认，通过色谱条件确认，质谱联用也可以作为进一步确证的手段。
十、外标法 是实验室常用的定量方法，定量结果准确。其特点：
、不需要所有峰都流出或被检测到，只对目标组分作校正。
、需要标准样品。
、进样量必须准确。
、仪器必须有良好的稳定性。
十一、吸液过滤器清洗：用纯的异丙醇或的稀***超声，超声清洗无效时，需要更换。检查吸滤器网眼堵塞的方法，取出过滤部分，记录压力波形。如果取出后压力波形不正常，则吸滤器网眼堵塞。
二、液相色谱操作部分
液相色谱简易流程图
溶剂→输液泵→进样器→色谱柱→检测器→数据处理
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
高效液相色谱培训课件
一、原理：试样用三***乙酸溶液乙***提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色谱测定，外标法定量。
二、试剂与材料
除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。
甲醇：色谱纯。
乙***：色谱纯。
氨水：含量为～。
三***乙酸：()准确称取10g三***乙酸于1L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混匀后备用。。
柠檬酸。
辛烷磺酸钠：色谱纯。
离子对试剂缓冲溶液：准确称取2.10g柠檬酸和2.16g辛烷磺酸钠，加入约水溶解，调节至后，定容至1L备用。
甲醇水溶液：准确量取甲醇和水混匀后，用有机系膜过滤，超声半小时，备用。并在下一次用前需要再超声—。
氨化甲醇溶液（）：准确量取氨水和甲醇，混匀后备用。
三聚******标准品：，纯度大于。
三聚******标准储备液：准确称取（精确到）三聚******标准品于容量瓶中，
