微生物实验课件:实验3

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1、 实验三实验三 主要内容主要内容(一)细菌的人工培养(一)细菌的人工培养(二)正常人体及环境中细菌的检查(二)正常人体及环境中细菌的检查(三)理化生物因素对细菌的影响(三)理化生物因素对细菌的影响 细菌的生长条件包括:营养;适宜温度;细菌的生长条件包括:营养;适宜温度;一定的酸碱度;适当的气体环境;渗透压。一定的酸碱度;适当的气体环境;渗透压。 因此,可根据细菌对营养、因此,可根据细菌对营养、PH、渗透压的要、渗透压的要求制备求制备细菌培养基。细菌培养基。把细菌接种于培养基后,放恒把细菌接种于培养基后,放恒温温 (一般为(一般为37)箱内培养一定时间(通常)箱内培养一定时间(通常1824h),
2、细菌便可大量繁殖,可进一步观察和研),细菌便可大量繁殖,可进一步观察和研究其生物学特性。究其生物学特性。细菌的人工培养细菌的人工培养 细菌的人工培养程序为细菌的人工培养程序为 1. 估计标本中细菌种类、数量及培养目的等,估计标本中细菌种类、数量及培养目的等,选选用适当的培养基及接种技术。用适当的培养基及接种技术。 2. 适宜的气体环境,适宜的气体环境,37,1824h。 液体液体培养基培养基斜面斜面培养基培养基 接种技术一般分为接种技术一般分为分离分离培养接种法和培养接种法和纯种纯种细细菌接种法。菌接种法。 细菌的接种技术细菌的接种技术 被检材料如粪便、痰、脓汁、尿液等常混杂有被检材料如粪便、
3、痰、脓汁、尿液等常混杂有多种细菌,平板划线法可使混杂的细菌在琼脂平板多种细菌,平板划线法可使混杂的细菌在琼脂平板表面表面分散生长,分散生长,各自形成不同的菌落,再根据菌落各自形成不同的菌落,再根据菌落的形态特征,挑选的形态特征,挑选单个菌落单个菌落继续培养,以此分离获继续培养,以此分离获得纯种细菌,用于进一步研究、鉴定或保存。得纯种细菌,用于进一步研究、鉴定或保存。 平板划线的方法根据待检标本中细菌的数量来平板划线的方法根据待检标本中细菌的数量来选择,可分为选择,可分为分段划线法和连续划线法分段划线法和连续划线法两大类。两大类。(一)分离培养接种法(一)分离培养接种法-平板划线法:平板划线法:
4、第一区划线第一区划线接种环灭菌接种环灭菌第二区划线第二区划线接种环灭菌接种环灭菌第三区划线第三区划线接种环灭菌接种环灭菌1分段划线法(分区划线法):分段划线法(分区划线法): 检查材料中含菌量较多时多用此法,检查材料中含菌量较多时多用此法,以求以求获得孤立菌落。获得孤立菌落。 2. 连续划线法:连续划线法: 检查材料中含菌量较少时可用本法。检查材料中含菌量较少时可用本法。 (二)纯种细菌接种法(二)纯种细菌接种法 细菌经分离培养出单个菌落后,细菌经分离培养出单个菌落后,常需再移种常需再移种至其他培养基中,以进一步鉴定或保存菌种。根至其他培养基中,以进一步鉴定或保存菌种。根据接种培养基之物理性状