微生物的培养与应用.pdf

生物技术实践专题
——微生物的培养与应用
主讲教师：毕诗秀
一、基础知识
1.微生物的概念
2.培养基
⑴什么是培养基？
⑵培养基中所含的营养物质
⑶培养基的种类
3.微生物培养的无菌操作技术
实验室常用的消毒和灭菌目的及方法
无菌技术 目的 具体方法
消毒 用较温和的物理、化学方法杀 高温煮沸消毒法
死物体表面或内部一部分有害 巴氏消毒法
的微生物——营养体 （不包 化学药剂消毒（酒精、消毒
括芽孢和孢子） 水等）
灭菌 用强烈的理化因素杀死物体内 高压蒸汽灭菌
外所有的微生物，包括芽孢（休 灼烧灭菌
眠体）和孢子（繁殖体） 干热灭菌
熏蒸灭菌
紫外线照射灭菌
细菌过滤器
4.微生物实验操作
⑴制备培养基
⑵微生物接种方法
1.平板划线法：
2.稀释涂布（平板）法
菌落数 30~300 个/平板为宜
测得的活菌数比实际数可能偏小
二、具体实验课题
㈠大肠杆菌的培养和分离
1.LB 培养基配方：（固体和液体培养基）
蛋白胨 10g，酵母提取物 5g，***化钠 10g，（15g 琼脂）加水定容至 1000ml
2.实验流程
3.实验结果观察和分析
⑴观察平板划线法获得的单菌落
⑵观察液体培养基的浑浊度
⑶显微镜下观察经革兰氏染色的大肠杆菌
总结微生物培养的基本程序
㈡土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1.实验原理
2.培养基
LB 全营养细菌培养基配方：
蛋白胨、酵母提取物、***化钠、琼脂糖
尿素培养基配方：