《检验仪器分析》第10章免疫分析
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1、免疫分析相关仪器免疫分析相关仪器 第十章第十章 主讲人：周振华主讲人：周振华2教学基本要求教学基本要求v掌掌 握握（1）免疫分析相关仪器检测的基本原理）免疫分析相关仪器检测的基本原理 （2）免疫分析相关仪器的基本结构）免疫分析相关仪器的基本结构 （3）免疫分析相关仪器的使用与维护）免疫分析相关仪器的使用与维护v熟熟 悉悉（1）免疫分析相关仪器的分类和特点）免疫分析相关仪器的分类和特点 （2）免疫分析相关仪器的性能评价）免疫分析相关仪器的性能评价 （3）免疫分析相关仪器常见故障与处理）免疫分析相关仪器常见故障与处理v了了 解解（1）免疫分析相关仪器的发展和作用）免疫分析相关仪器的发展和作用 （2
2、）免疫分析相关仪器的临床应用）免疫分析相关仪器的临床应用第十章第十章 免疫分析相关仪器免疫分析相关仪器第二节第二节 发光免疫分析仪发光免疫分析仪2第四节第四节 时间分辨分析仪时间分辨分析仪4第一节第一节 酶免疫分析仪酶免疫分析仪 3 1第三节第三节 免疫浊度分析仪免疫浊度分析仪3 3第第五五节节 放射免疫分析仪放射免疫分析仪54前前 言言v大量免疫学分析技术被不断地创新、发明，极大大量免疫学分析技术被不断地创新、发明，极大地促进了临床免疫学检测项目的推陈出新和检测地促进了临床免疫学检测项目的推陈出新和检测手段的自动化、智能化和网络化。手段的自动化、智能化和网络化。v基于各种免疫分析技术（基于各
3、种免疫分析技术（酶免疫分析、发光免疫酶免疫分析、发光免疫分析、免疫浊度分析、荧光免疫分析、放射免疫分析、免疫浊度分析、荧光免疫分析、放射免疫分析分析）的仪器也应运而生。）的仪器也应运而生。返回目录5第一节第一节 酶免疫分析仪酶免疫分析仪v酶免疫分析（酶免疫分析（enzyme immunoassay，EIA）v目前临床免疫检验最常用目前临床免疫检验最常用的分析技术，具有灵敏度的分析技术，具有灵敏度高，特异性强，试剂稳定高，特异性强，试剂稳定，操作简单、快速且无放，操作简单、快速且无放射性污染等优点。射性污染等优点。返回目录6一、酶免疫分析仪的分型一、酶免疫分析仪的分型返回目录7（一）酶免疫分析技
4、术的分类（一）酶免疫分析技术的分类v根据抗原抗体反应后根据抗原抗体反应后是否需要分离结合与游离的是否需要分离结合与游离的酶标记物酶标记物，可分为：，可分为：测定对象主要是激素、药物测定对象主要是激素、药物等小分子抗原或半抗原，其等小分子抗原或半抗原，其测定模式为测定模式为竞争抑制法竞争抑制法，无，无需分离结合和游离的酶标记需分离结合和游离的酶标记物。主要有酶扩大免疫测定物。主要有酶扩大免疫测定技术和克隆酶供体免疫测定技术和克隆酶供体免疫测定技术两种方法。技术两种方法。 均相酶免疫分析法均相酶免疫分析法 需采用适当的方式将游离的和需采用适当的方式将游离的和结合的酶标记物加以结合的酶标记物加以分离
5、分离，可，可分为液相酶免疫法和固相酶免分为液相酶免疫法和固相酶免疫法两种，后者称为疫法两种，后者称为酶联免疫酶联免疫吸附测定吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）。）。 非均相酶免疫分析法非均相酶免疫分析法 返回目录8双抗体夹心法反应原理示意图ELISA检测方法：双抗体夹心法，间接法、双抗原夹心法、竞争抑制法91011（二）酶免疫分析仪的类型（二）酶免疫分析仪的类型v根据固相支持物的不同而设计成的酶免疫分析仪根据固相支持物的不同而设计成的酶免疫分析仪可以分为可以分为 磁微粒固相酶免疫分析仪磁微粒固相酶免疫分析仪 管式固相酶免疫分析仪管式固相酶
6、免疫分析仪 微孔板固相酶免疫分析仪微孔板固相酶免疫分析仪微粒固相酶免疫分析仪微粒固相酶免疫分析仪 返回目录12二、酶免疫分析仪的工作原理二、酶免疫分析仪的工作原理 v以临床免疫检以临床免疫检验最常用的验最常用的酶酶标仪标仪为例介绍为例介绍酶免疫分析仪酶免疫分析仪的工作原理。的工作原理。返回目录13二、工作原理二、工作原理 返回目录14v酶免疫分析仪其实就是一台特殊的光电比色计或酶免疫分析仪其实就是一台特殊的光电比色计或分光光度计，根据分光光度计，根据ELISA技术的特点而设计。技术的特点而设计。二、酶免疫分析仪的工作原理二、酶免疫分析仪的工作原理 返回目录15三、酶免疫分析仪的基本结构三、酶免
7、疫分析仪的基本结构v全自动酶标仪可以将整个系统分为全自动酶标仪可以将整个系统分为加样系统加样系统 温育系统温育系统软件控制系统软件控制系统判读系统判读系统液路动力系统液路动力系统洗板系统洗板系统这些这些系统系统既相既相互独互独立又立又联系联系紧密。紧密。机械臂系统机械臂系统返回目录16 温育箱温育箱 反应板反应板 存储器存储器返回目录17X-YX-Y头架头架返回目录18 样品架样品架 5050根装根装 50503 3返回目录19 4 4根独立根独立 上下上下 吸移管吸移管返回目录20 检检 测测 光光 纤纤返回目录21 反应板反应板 反应板反应板 夹具夹具 返回目录22 清清 洗洗 装装 置置
8、返回目录23 供水箱供水箱 废水箱废水箱 返回目录24四、性能评价四、性能评价v目前国内已经初步建立起一套酶免疫分析仪目前国内已经初步建立起一套酶免疫分析仪性能的评价体系。性能的评价体系。1噪声检测噪声检测2准确度准确度3精密度精密度4灵敏度灵敏度5通道差与孔间差检测通道差与孔间差检测6线性范围线性范围 7双波长评价双波长评价 返回目录25五、仪器的操作与维护与常见故障处理五、仪器的操作与维护与常见故障处理开开 机机参数设置参数设置打开酶联软件，进入主菜单，选择测量模式打开酶联软件，进入主菜单，选择测量模式以及某些参数以及某些参数将离心好的样品，放入样品盘，选择相应的将离心好的样品，放入样品盘
9、，选择相应的测定程序以及试剂盘。测定程序以及试剂盘。样品装载样品装载关关 机机卸载样品盘，清洗管路后关闭仪器卸载样品盘，清洗管路后关闭仪器接通接线板电源，打开酶标仪器开关，仪器接通接线板电源，打开酶标仪器开关，仪器开始自检，自动预热开始自检，自动预热23分钟。分钟。结果结果测定结束后，保存测定结果，并用外置打印测定结束后，保存测定结果，并用外置打印机打印结果机打印结果样本测定样本测定检查无误后，按检查无误后，按”开始开始”键，酶标仪对样品键，酶标仪对样品开始进行测试开始进行测试 （一）（一） 操操 作作 流流 程程 图图返回目录26（二）仪器的维护（二）仪器的维护v酶免疫分析仪是一种精密的光学
10、仪器，良好的工酶免疫分析仪是一种精密的光学仪器，良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性，还能够延作环境不仅能确保其准确性和稳定性，还能够延长其使用寿命。长其使用寿命。返回目录27安装要求安装要求仪器放置在无强磁场和干扰电压且噪音低于仪器放置在无强磁场和干扰电压且噪音低于40分贝分贝操作环境空气清洁，温、湿度适宜操作环境空气清洁，温、湿度适宜避免阳光直射，以延缓光学部件的老化避免阳光直射，以延缓光学部件的老化操作时电压应保持稳定操作时电压应保持稳定保持工作台面干燥、干净、水平，有足够操作空间保持工作台面干燥、干净、水平，有足够操作空间返回目录28日常维护日常维护仪器外部的清洁仪器外部的清洁检查
11、加样系统检查加样系统清洁仪器内部清洁仪器内部 每日仪器工作结束后的维护每日仪器工作结束后的维护处理废弃物处理废弃物返回目录29月维护月维护使用仪器厂商提供的软件执行检查程序，并打印检使用仪器厂商提供的软件执行检查程序，并打印检查结果报告归档；查结果报告归档；检查所有管路及电源线是否有磨损及破裂检查所有管路及电源线是否有磨损及破裂;检查样品注射器及与之相连探针是否有泄露及破损检查样品注射器及与之相连探针是否有泄露及破损;检查微孔探测器是否有堵塞物检查微孔探测器是否有堵塞物;检查支撑机械臂的轨道是否牢固，并检查机械臂及检查支撑机械臂的轨道是否牢固，并检查机械臂及其轨道上是否有灰尘。其轨道上是否有灰
